Transmisja pourodzeniowa wirusa niedoboru odporności typu 1 z matki na niemowlę – prospektywne badanie kohortowe w Kigali w Rwandzie cd

Amplifikację docelowego DNA przeprowadzono przez 40 cykli w termocyklerze Cetus DNA (Perkin-Elmer Cetus). W tej procedurze próbki DNA ogrzewano do 94 ° C przez 36 sekund (w celu denaturacji DNA), ochłodzono do 50 ° C przez 42 sekundy (do hybrydyzacji ze starterami) i inkubowano przez 3 minuty w 68 ° C (dla amplifikacji) . Dla każdego użytego startera konieczne było zoptymalizowanie stężenia chlorku magnezu w buforze. W drugiej amplifikacji .g pierwotnie zamplifikowanego DNA amplifikowano w 20 .l mieszaniny reakcyjnej, a ten sam program, jak opisano powyżej, przeprowadzono z drugą parą starterów umiejscowionych w regionie początkowo amplifikowanych. Pięć do 10 .l drugiej mieszaniny PCR analizowano za pomocą elektroforezy na żelu agarozowym o 4 procentach o niskiej temperaturze topnienia (SeaKem GTG, procent i Nu-Sieve GTG, 3 procent) zawierającym bromek etydyny. Wzmocniony DNA wizualizowano fluorescencją ultrafioletową i utrwalano na natychmiastowych fotografiach. Test PCR uznano za pozytywny, gdy wykryto wykrywalny sygnał dla co najmniej dwóch z trzech par starterów. Definicja pourodzeniowego zakażenia HIV-1
U niemowlęcia lub dziecka z serokonwersją HIV-1 po wcześniejszym ujemnym wyniku PCR, poporodową infekcję HIV-1 uznano za możliwą, jeśli serokonwersja wystąpiła w pierwszych trzech miesiącach życia i udowodniono, że serokonwersja wystąpiła po tym czasie.
Analiza statystyczna
Test chi-kwadrat, dwukierunkowy test Fishera, test U Manna-Whitneya i test Kruskala-Wallisa zastosowano do porównań z poziomem istotności 0,05. Wskaźniki szans zostały obliczone w celu zmierzenia siły asocjacji, gdy jest to właściwe, a ich 95-procentowe przedziały ufności zostały obliczone zgodnie z metodą pola kukurydzianego. Dokładne granice ufności stawek zostały również obliczone, gdy było to konieczne.
Wyniki
Serokonwersja HIV-1 w matkach
Tabela 2. Tabela 2. Częstość występowania Serokonwersji HIV-1 w zależności od czasu porodu lub porodu w 212 parach matek i niemowląt w Kigali, Rwanda, 1988-1990. Dwieście dziewiętnaście niemowląt urodzonych do 217 HIV-1-seronegatywnych matki zostały zapisane. W ciągu pierwszych trzech miesięcy jedna matka i cztery niemowlęta (pięć par) zmarły z przyczyn niezwiązanych z HIV, a dwie pary matka-niemowlę straciły kontakt z chorobą. Średni okres obserwacji dla pozostałych 212 matek-niemowląt wynosił 16,6 miesiąca, co daje łącznie 3639 miesięcy obserwacji (zakres od 3 do 24 miesięcy na parę). Serokonwersja po porodzie HIV-1 została wykazana u 16 z 210 matek. Czas tych serokonwersji pokazano w Tabeli 2. Częstość serokonwersji u matek wynosiła 3,4 procent w pierwszych sześciu miesiącach po porodzie (95 procent przedziału ufności, 0,9 do 5,9 procent), 2,6 procent w drugim półroczu (95 procent przedział ufności, od 0,3 do 4,9 procent) i 2,6 procent w trzecim półroczu (przedział ufności 95 procent, od 0,1 do 5,1 procent). Liczba krwinek subpopulacji krążących jednojądrzastych komórek 15 dni po porodzie była dostępna dla 15 z 16 matek, które serokonwersowały. Stosunek OKT4 / OKT8 był odwrócony w trzech z nich, w każdym przypadku z powodu względnego wzrostu subpopulacji CD8 +
[przypisy: oregasept h97, olx wagrowiec, viagra bez recepty cena ]